"chromatographic analysis", "chromatography" ဟုလည်းသိကြသော ခရိုမာတီဂရပ်ဖစ်သည် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းနှင့် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းနည်းလမ်းဖြစ်ပြီး ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုဆိုင်ရာ ဓာတုဗေဒ၊ အော်ဂဲနစ်ဓာတုဗေဒ၊ ဇီဝဓာတုဗေဒနှင့် အခြားနယ်ပယ်များတွင် အသုံးချမှုများစွာပါရှိသည်။
chromatography ကို တည်ထောင်သူမှာ ရုရှားရုက္ခဗေဒပညာရှင် M.Tsvetter ဖြစ်သည်။1906 ခုနှစ်တွင် ရုရှားရုက္ခဗေဒပညာရှင် Zvetter သည် သူ၏စမ်းသပ်မှုရလဒ်ကို ထုတ်ပြန်ခဲ့သည်- အပင်အရောင်ခြယ်ပစ္စည်းများကို ခွဲထုတ်ရန်အတွက် ကယ်လ်စီယမ်ကာဗွန်နိတ်မှုန့်ပါသည့် ဖန်ပြွန်ထဲသို့ ရေနံအီသာထုတ်ယူမှုကို လောင်းထည့်ကာ အပေါ်မှအောက်သို့ ရေနံအီတာဖြင့် ဖယ်ထုတ်ခဲ့သည်။မတူညီသော ဆိုးဆေးများသည် ကယ်လစီယမ်ကာဗွန်နိတ်အမှုန်များ၏ မျက်နှာပြင်ပေါ်တွင် မတူညီသော စုပ်ယူနိုင်စွမ်းရှိသောကြောင့် စွန့်ထုတ်ခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်နှင့်အတူ မတူညီသောအရောင်ခြယ်ပစ္စည်းများသည် မတူညီသောအမြန်နှုန်းဖြင့် ရွေ့လျားသွားသဖြင့် မတူညီသောအရောင်အသွေးများ ဖြစ်ပေါ်လာသည်။အရောင်ခြယ်ပစ္စည်း အစိတ်အပိုင်းများကို ခွဲခြားထားသည်။ဤခွဲထွက်နည်းကို chromatography ဟုခေါ်သည်။
အပင်အရွက် အရောင်ခြယ်မှု ခွဲထုတ်ခြင်း စမ်းသပ်မှု၏ သရုပ်ဖော်ပုံ
ခွဲထွက်ခြင်းနည်းလမ်းများ စဉ်ဆက်မပြတ် ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်လာသည်နှင့်အမျှ အရောင်မဲ့ အရာဝတ္ထုများသည် ခွဲထွက်ခြင်း၏ အရာဝတ္ထုများ ပိုများလာကာ၊ chromatography သည်လည်း "အရောင်" ၏ အဓိပ္ပါယ်ကို တဖြည်းဖြည်း ပျောက်ကွယ်သွားသော်လည်း အမည်ကို ယနေ့တိုင် အသုံးပြုနေဆဲဖြစ်သည်။
Chromatographic အမျိုးအစားခွဲခြားခြင်း။
chromatography ၏ အနှစ်သာရသည် ခွဲထုတ်ရမည့် မော်လီကျူးများကို stationary phase နှင့် mobile phase အကြား ပိုင်းခြားပြီး ဟန်ချက်ညီစေသော လုပ်ငန်းစဉ်တစ်ခုဖြစ်သည်။မတူညီသောဒြပ်ပစ္စည်းများအား အဆင့်နှစ်ဆင့်ကြားတွင် ကွဲပြားစွာ ပိုင်းခြားထားသောကြောင့် ၎င်းတို့အား မိုဘိုင်းအဆင့်နှင့် မတူညီသောအမြန်နှုန်းဖြင့် ရွေ့လျားစေသည်။မိုဘိုင်းအဆင့်၏ရွေ့လျားမှုနှင့်အတူ, အရောအနှောအတွင်းရှိကွဲပြားခြားနားသောအစိတ်အပိုင်းများကိုငုတ်လျှိုးအဆင့်တွင်တစ်ခုနှင့်တစ်ခုခြားထားသည်။ယန္တရားပေါ် မူတည်၍ အမျိုးအစား အမျိုးမျိုး ခွဲခြားနိုင်သည်။
1, two-phase ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာပြည်နယ်အမျိုးအစားခွဲခြားမှုအရသိရသည်။
မိုဘိုင်းအဆင့်- ဂတ်စ်ခရိုမာတီဂရမ်၊ အရည် ခရိုမာတိုပညာ၊ supercritical fluid chromatography
စာရေးကိရိယာအဆင့်- ဓာတ်ငွေ့-အစိုင်အခဲ၊ ဓာတ်ငွေ့-အရည်၊အရည်-အခဲ၊ အရည်-အရည်
2, stationary phase အမျိုးအစားခွဲခြားမှုပုံစံနှင့်အညီ
ကော်လံ chromatography- ထုပ်ပိုးထားသော ကော်လံခရိုမာတီဂရမ်၊ သွေးကြောမျှင်ကော်လံ ခရိုမာတီဂရမ်၊
Plane chromatography- စက္ကူ chromatography၊ ပါးလွှာသော အလွှာ chromatography၊ ပိုလီမာ အမြှေးပါး ခရိုမာတိုပညာ
3, ခွဲခြားယန္တရားအရခွဲခြား
စုပ်ယူမှု chromatography- adsorbents တွင် ၎င်းတို့၏ စုပ်ယူမှုနှင့် စုပ်ယူမှုစွမ်းရည်အလိုက် မတူညီသော အစိတ်အပိုင်းများကို ခွဲခြားထားသည်။
Partition chromatography- ကွဲပြားသော အစိတ်အပိုင်းများကို ဆားဗေးတွင် ၎င်းတို့၏ ပျော်ဝင်နိုင်မှုအရ ခွဲခြားထားသည်။
မော်လီကျူးဖယ်ထုတ်ခြင်း chromatography- ခွဲထုတ်ခြင်း၏ မော်လီကျူးအရွယ်အစား အရွယ်အစားအရ ln ion exchange chromatography- ion-exchange resin ခွဲခြားခြင်းအတွက် ဆက်စပ်မှု၏ မတူညီသော အစိတ်အပိုင်းများ
Affinity chromatography- ဇီဝ macromolecules များကြား တိကျသော ဆက်နွယ်မှု ရှိနေမှုကို အသုံးပြု၍ ပိုင်းခြားခြင်း
Capillary electrophoresis- ရွေ့လျားနိုင်မှု နှင့်/သို့မဟုတ် partition ပြုမူပုံ ကွာခြားချက်များအရ အစိတ်အပိုင်းများကို ခွဲခြားထားသည်။
Chiral chromatography ကို chiral ဆေးဝါးများ ခွဲခြားခြင်းနှင့် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းအတွက် အသုံးပြုသည်၊ အမျိုးအစားသုံးမျိုးခွဲနိုင်သည်- chiral derivatization reagent နည်းလမ်း၊Chiral မိုဘိုင်းအဆင့်ဖြည့်စွက်နည်းလမ်း;Chiral stationary phase ဖြေရှင်းနည်း
chromatography အတွက် အခြေခံ ဝေါဟာရများ
အချိန်နှင့် chromatographic ပိုင်းခြားမှုကို ထောက်လှမ်းပြီးနောက် အစိတ်အပိုင်းများ၏ တုံ့ပြန်မှုအချက်ပြမှုများကို ကြံစည်ခြင်းဖြင့် ရရှိသော မျဉ်းကွေးများကို chromatograms ဟုခေါ်သည်။
အခြေခံမျဉ်း-အချို့သော chromatographic အခြေအနေများအောက်တွင်၊ ot line တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း မိုဘိုင်းအဆင့်ကို detector စနစ်မှတဆင့် ဖြတ်သန်းသွားသောအခါတွင် ထုတ်ပေးသော အချက်ပြမျဉ်းကွေးကို baseline ဟုခေါ်သည်။စမ်းသပ်မှုအခြေအနေ တည်ငြိမ်သောအခါ၊ အခြေခံမျဉ်းသည် အလျားလိုက်ဝင်ရိုးနှင့် အပြိုင်မျဉ်းဖြစ်သည်။အခြေခံစာကြောင်းသည် အချိန်ကြာလာသည်နှင့်အမျှ တူရိယာ၏ဆူညံသံကို ထင်ဟပ်စေသည်။
အထွတ်အထိပ် အမြင့်-AB လိုင်းတွင်ပြထားသည့်အတိုင်း h ဖြင့်ဖော်ပြသည့် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်အမြင့်ဆုံးအမှတ်နှင့် အခြေခံမျဉ်းကြား ဒေါင်လိုက်အကွာအဝေး။
ဒေသအကျယ်-chromatographic peak ၏ ဧရိယာအကျယ်သည် ခွဲထွက်ခြင်းထိရောက်မှုနှင့် တိုက်ရိုက်သက်ဆိုင်သည်။chromatographic peak width ကိုဖော်ပြရန် နည်းလမ်းသုံးမျိုးရှိသည်- စံသွေဖည် σ၊ peak width W နှင့် FWHM W1/2။
စံသွေဖည် (σ)σ သည် သာမာန်ဖြန့်ဖြူးမျဉ်းကွေးရှိ inflection အမှတ်နှစ်ခုကြား တစ်ဝက်အကွာအဝေးဖြစ်ပြီး σ ၏တန်ဖိုးသည် ကော်လံနှင့်ဝေးသောအစိတ်အပိုင်းများ၏ ကွဲလွဲမှုအတိုင်းအတာကို ညွှန်ပြသည်။σ ၏တန်ဖိုးပိုကြီးလေ၊ အညစ်အကြေးများ ပြန့်ကျဲလေလေ၊ ခွဲထွက်ခြင်းအကျိုးသက်ရောက်လေလေဖြစ်သည်။အပြန်အလှန်အားဖြင့်၊ စွန့်ပစ်ပစ္စည်းများသည် စုစည်းနေပြီး ခွဲထွက်ခြင်းအကျိုးသက်ရောက်မှုမှာ ကောင်းမွန်သည်။
အထွတ်အထိပ်အကျယ် W:chromatographic peak ၏နှစ်ဖက်စလုံးရှိ လမ်းဆုံအမှတ်များကို တန်းဂျင့်မျဉ်းများအဖြစ် အသုံးပြုကြပြီး အခြေခံလိုင်းပေါ်ရှိ ကြားဖြတ်ကို peak width သို့မဟုတ် baseline width ဟုခေါ်သည်၊ ၎င်းကို ပုံ IJ တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း W အဖြစ်ဖော်ပြနိုင်သည်။သာမာန်ဖြန့်ဖြူးမှုနိယာမအရ peak width နှင့် standard deviation အကြား ဆက်နွယ်မှုကို W=4σ ဖြစ်သည်ဟု သက်သေပြနိုင်သည်။
W1/2-GH ၏ အကွာအဝေးအတွက် ပြထားသည့်အတိုင်း အထွတ်အထိပ် တစ်ဝက်ရှိ peak width ကို FWHM ဟုခေါ်သည်။W1/2=2.355σ၊ W=1.699W1/2။
W1/2၊ W နှစ်ခုစလုံးသည် σ မှဆင်းသက်လာပြီး ကော်လံအကျိုးသက်ရောက်မှုကို တိုင်းတာခြင်းအပြင် အမြင့်ဆုံးဧရိယာများကို တွက်ချက်ရန် အသုံးပြုပါသည်။FWHM တိုင်းတာခြင်းသည် ပို၍အဆင်ပြေပြီး အသုံးအများဆုံးဖြစ်သည်။
အကျဉ်းချုပ်
chromatographic peak outflow မျဉ်းကွေးမှ၊ အောက်ပါ ရည်မှန်းချက်များကို အောင်မြင်နိုင်သည်-
a၊ ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်အထွတ်အထိပ်များ၏ ထိန်းသိမ်းမှုတန်ဖိုးအပေါ် အခြေခံ၍ အရည်အသွေးပိုင်းခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကို လုပ်ဆောင်ခဲ့သည်။
b၊ chromatographic peak ၏ ဧရိယာ သို့မဟုတ် အထွတ်အထိပ်အပေါ်အခြေခံ၍ အရေအတွက်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း။
C. ကော်လံ၏ ခွဲထွက်မှုထိရောက်မှုကို ခရိုမာတိုဂရပ်အထွတ်အထွတ်၏ အထွတ်အထိပ်၏ သိမ်းဆည်းမှုတန်ဖိုးနှင့် အထွတ်အထိပ် အကျယ်အဝန်းအရ အကဲဖြတ်ခဲ့သည်
chromatography တွင်ပါ၀င်သော တွက်ချက်ပုံသေနည်း
1. ထိန်းသိမ်းမှုတန်ဖိုး
ထိန်းထားမှုတန်ဖိုးသည် ကော်လံတွင် နမူနာအစိတ်အပိုင်းတစ်ခုကို ထိန်းသိမ်းထားရသည့် အတိုင်းအတာကို ဖော်ပြရန်နှင့် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်လက္ခဏာဖော်ပြမှု၏ ညွှန်ပြချက်အဖြစ် အသုံးပြုထားသည်။၎င်း၏ကိုယ်စားပြုနည်းလမ်းမှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်။
ထိန်းသိမ်းချိန် tR
သေချိန်tM
ထိန်းထားချိန် tR ကို ချိန်ညှိပါ။'=tR-tM
(ငုတ်တုတ်အဆင့်တွင် ကုန်ဆုံးသည့်အချိန် စုစုပေါင်း)
ထိန်းသိမ်းမှုပမာဏ
VR=tR*F.(မိုဘိုင်းအဆင့်အလျင်၏ သီးခြား)
အသေထည်
VM=tM*Fc
(injector မှ detector ဆီသို့ flow path တွင် stationary phase မှ မသိမ်းပိုက်ထားသော space )
သိုလှောင်မှုပမာဏ VR ကို ချိန်ညှိပါ။'=t'R*Fc
2. နှိုင်းရထိန်းသိမ်းမှုတန်ဖိုး
နှိုင်းရထိန်းထားမှုတန်ဖိုး၊ ခွဲထွက်အချက်၊ အပိုင်းလိုက်ကိန်းအချိုး သို့မဟုတ် နှိုင်းယှဥ်စွမ်းရည်အချက်၊ သည် စမ်းသပ်ထားသောအစိတ်အပိုင်း၏ ချိန်ညှိထားသော ထိန်းသိမ်းချိန် (ထုထည်) ၏ အချိုးအစားသည် အချို့သော chromatographic အခြေအနေများအောက်တွင် စံ၏ထိန်းထားချိန် (ထုထည်) နှင့် အချိုးဖြစ်သည်။
Relative retention values များကို retention values များပေါ်တွင် flow rate နှင့် fixative loss ကဲ့သို့သော အချို့သောလည်ပတ်မှုအခြေအနေများ၏ လွှမ်းမိုးမှုကို ဖယ်ရှားရန် အသုံးပြုပါသည်။နှိုင်းယှဥ်ထိန်းထားမှုတန်ဖိုးရှိ စံနှုန်းသည် စမ်းသပ်ထားသောနမူနာတွင် အစိတ်အပိုင်းတစ်ခု သို့မဟုတ် အတုပြုလုပ်ထားသော ဒြပ်ပေါင်းတစ်ခု ဖြစ်နိုင်သည်။
3. ထိန်းထားမှုအညွှန်း
ထိန်းထားမှုအညွှန်းကိန်းသည် ပုံသေဖြေရှင်းချက် X တွင် စမ်းသပ်ရမည့် i ဓာတ်၏ ထိန်းသိမ်းမှုအညွှန်းကိန်းဖြစ်သည်။ n-alanes နှစ်ခုကို ရည်ညွှန်းပစ္စည်းများအဖြစ် ရွေးချယ်ထားပြီး၊ တစ်ခုမှာ N ကာဗွန်နံပါတ်ရှိပြီး နောက်တစ်ခုသည် N+n ပါရှိသည်။၎င်းတို့၏ ချိန်ညှိထားသော ထိန်းထားချိန်သည် t'r (N) နှင့် t'r (N+n) အသီးသီး ဖြစ်သောကြောင့် စမ်းသပ်ရမည့် အရာ၏ ချိန်ညှိထားသော ထိန်းသိမ်းချိန် t'r (i) သည် ၎င်းတို့ကြားတွင် အတိအကျဖြစ်သည်၊ ဆိုလိုသည်မှာ၊ t 'r (N) ။
ထိန်းသိမ်းမှုအညွှန်းကိန်းကို အောက်ပါအတိုင်း တွက်ချက်နိုင်ပါသည်။
4. စွမ်းရည်အချက် (ဋ)၊
မျှခြေတွင်၊ stationary phase (s) ရှိ အစိတ်အပိုင်းတစ်ခု၏ ဒြပ်ထုအချိုးသည် မိုဘိုင်းအဆင့် (m) နှင့် capacity factor ဟုခေါ်သည်။ဖော်မြူလာမှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်။
5、Partition coefficient (K) မျှခြေတွင်၊ အစိတ်အပိုင်းတစ်ခု၏ အာရုံစူးစိုက်မှုအချိုးသည် မိုဘိုင်းအဆင့် (m) နှင့် partition coefficient ဟုခေါ်သည်။ဖော်မြူလာမှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်။
K နှင့် k အကြားဆက်စပ်မှု
၎င်းသည် ကော်လံအမျိုးအစားနှင့် ဖွဲ့စည်းတည်ဆောက်ပုံ၏ အရေးကြီးသော ထုံးဖွဲ့မှုကို ရောင်ပြန်ဟပ်သည်။
အကျဉ်းချုပ်
သိုလှောင်မှုတန်ဖိုးနှင့် စွမ်းရည်အချက်နှင့် အပိုင်းလိုက်ကိန်းကြား ဆက်စပ်မှု-
Chromatographic ပိုင်းခြားခြင်းသည် ပုံသေဆွေမျိုးနမူနာတစ်ခုရှိ အစိတ်အပိုင်းတစ်ခုစီ၏ စုပ်ယူမှု သို့မဟုတ် ဖျက်သိမ်းနိုင်မှု ကွာခြားချက်အပေါ် အခြေခံထားပြီး၊ အပိုင်းချက်ဖော်ကိန်း K (သို့မဟုတ် စွမ်းရည်အချက် k) တန်ဖိုး၏ ပမာဏဖြင့် အရေအတွက်အားဖြင့် ဖော်ပြနိုင်သည်။
ပြင်းထန်သော စုပ်ယူမှု သို့မဟုတ် ကြေညက်နိုင်စွမ်းရှိသော အစိတ်အပိုင်းများတွင် ကြီးမားသော partition coefficient (သို့မဟုတ် capacity factor) နှင့် ကြာရှည်စွာ ထိန်းထားနိုင်မှုရှိသည်။အပြန်အလှန်အားဖြင့်၊ စုပ်ယူမှုအားနည်းသော သို့မဟုတ် ပျော်ဝင်နိုင်မှုရှိသော အစိတ်အပိုင်းများသည် သေးငယ်သော partition coefficient နှင့် တိုတောင်းသော ထိန်းသိမ်းချိန်ရှိသည်။
အခြေခံ chromatography သီအိုရီ
1. ဗန်းသီအိုရီ
(၁) အပူချိန်- အပူချိန် သီအိုရီကို ရှေ့တန်းတင်ပါ။
Martin နှင့် Synge မှ အဆိုပြုသော တာဝါတိုင်ပြားပုံစံဖြင့် စတင်ခဲ့သည်။
Fractionating ကော်လံ- မတူညီသော ကွဲကွာမှု၏ ဆူမှတ်အရ ဓာတ်ငွေ့-အရည် မျှခြေ၏ အကြိမ်များစွာအတွက် ဗန်းထဲတွင်။
ကော်လံ- အစိတ်အပိုင်းများကို အဆင့်နှစ်ဆင့်ကြားရှိ အပိုင်းများစွာဖြင့် ဟန်ချက်ညီစေပြီး မတူညီသော အပိုင်းလိုက်ကိန်းများအလိုက် ပိုင်းခြားထားသည်။
(၂) ယူဆချက်
(၁) ကော်လံတွင် ဗန်းများစွာပါရှိပြီး အစိတ်အပိုင်းများသည် ဗန်းကြားကာလအတွင်း ဖြန့်ဝေမှုမျှခြေသို့ လျင်မြန်စွာရောက်ရှိနိုင်သည် (ဗန်း၏အမြင့်ကို ဆိုလိုသည်)။
(၂) မိုဘိုင်းအဆင့်သည် အဆက်မပြတ်မဟုတ်ဘဲ တောက်လျှောက်သော ကော်လံထဲသို့ ဝင်ရောက်သည်၊ ဆိုလိုသည်မှာ စာပိုဒ်တစ်ခုစီသည် ကော်လံတစ်ခုစီ၏ အသံအတိုးအကျယ်ဖြစ်သည်။
(၃) နမူနာကို ကော်လံပြားတစ်ခုစီသို့ ပေါင်းထည့်သောအခါ၊ ကော်လံဝင်ရိုးတစ်လျှောက် နမူနာပျံ့နှံ့မှုကို လျစ်လျူရှုနိုင်သည်။
(၄) partition coefficient သည် အစိတ်အပိုင်းများ၏ ပမာဏနှင့် ကင်း၍ tray များအားလုံးတွင် တူညီပါသည်။ဆိုလိုသည်မှာ၊ partition coefficient သည် taban တစ်ခုစီတွင် ကိန်းသေဖြစ်သည်။
(၃) နိယာမ
ဗန်းသီအိုရီ၏ ဇယားကွက်
ယူနစ်ဒြပ်ထု၏ အစိတ်အပိုင်းတစ်ခုဖြစ်သည့် m=1 (ဥပမာ၊ 1mg သို့မဟုတ် 1μg) ကို နံပါတ် 0 ဗန်းထဲသို့ ပေါင်းထည့်ပါက၊ နှင့် ဖြန့်ဝေမှု မျှခြေပြီးနောက် k=1၊ အမည်ရ ns=nm၊ nm=ns=0.5 ဖြစ်သောကြောင့် ဖြစ်သည်။
သယ်ဆောင်သူဓာတ်ငွေ့၏ ပန်းကန်ပြား ထုထည် (lΔV) သည် pulsation ပုံစံဖြင့် ပန်းကန်ပြား 0 သို့ ဝင်ရောက်သောအခါ၊ ဓာတ်ငွေ့အဆင့်ရှိ nm အစိတ်အပိုင်း ပါဝင်သော သယ်ဆောင်ဓာတ်ငွေ့ကို ပန်းကန် 1 သို့ တွန်းပို့သည်။ ဤအချိန်တွင်၊ ပန်းကန် 0 အရည်အဆင့်ရှိ ns အစိတ်အပိုင်း၊ နှင့် plate 1 ၏ဓာတ်ငွေ့အဆင့်ရှိ nm အစိတ်အပိုင်းအား အဆင့်နှစ်ဆင့်ကြားတွင် ပြန်လည်ဖြန့်ဝေမည်ဖြစ်သည်။ထို့ကြောင့်၊ ပန်းကန်ပြား 0 တွင်ပါရှိသော အစိတ်အပိုင်းစုစုပေါင်းပမာဏသည် 0.5 ဖြစ်ပြီး ယင်းတွင် ဓာတ်ငွေ့နှင့် အရည်အဆင့်များသည် 0.25 တစ်ခုစီဖြစ်ပြီး ပန်းကန် 1 တွင်ပါရှိသော စုစုပေါင်းပမာဏသည် 0.5 ဖြစ်သည်။ဓာတ်ငွေ့နှင့် အရည်အဆင့်များသည်လည်း 0.25 ဖြစ်သည်။
ကော်လံထဲသို့ ပန်းကန်ပြား ထုထည် သယ်ဆောင်သူ ဓာတ်ငွေ့ အသစ်ကို တွန်းပို့လိုက်တိုင်း ဤလုပ်ငန်းစဉ်ကို ထပ်ခါတလဲလဲ လုပ်ဆောင်သည် (အောက်ပါဇယားကို ကြည့်ပါ)။
(4) Chromatographic outflow မျဉ်းကွေးညီမျှခြင်း
σ သည် စံသွေဖည်မှု၊ ထိန်းထားချိန်၊ C သည် မည်သည့်အချိန်တွင်မဆို အာရုံစူးစိုက်မှု၊
C သည် ဆေးထိုးအာရုံစူးစိုက်မှုဖြစ်ပြီး၊ ဆိုလိုသည်မှာ အစိတ်အပိုင်းများ၏ စုစုပေါင်းပမာဏ (peak area A) ဖြစ်သည်။
(၅) ကော်လံထိရောက်မှု ဘောင်များ
အဆက်မပြတ် tR တွင်၊ သေးငယ်သော W သို့မဟုတ် w 1/2 (ဆိုလိုသည်မှာ ကျဉ်းမြောင်းသော အထွတ်အထိပ်)၊ သီအိုရီပိုင်းပြား n အရေအတွက် ပိုကြီးလေ၊ သီအိုရီပိုင်းပြားအမြင့် သေးငယ်လေ၊ ကော်လံ၏ ခွဲထွက်နိုင်မှု မြင့်မားလေဖြစ်သည်။ထိရောက်သောသီအိုရီဗန်း neff တွင်လည်း အလားတူပင်ဖြစ်သည်။ထို့ကြောင့်၊ သီအိုရီအရ ဗူးခွံအရေအတွက်သည် ကော်လံများ၏ ထိရောက်မှုကို အကဲဖြတ်ရန် အညွှန်းတစ်ခုဖြစ်သည်။
(၅) အင်္ဂါရပ်များနှင့် အားနည်းချက်များ
> အားသာချက်များ
ဗန်းသီအိုရီသည် semi-empirical ဖြစ်ပြီး outflow curve ၏ ပုံသဏ္ဍာန်ကို ရှင်းပြသည်။
အစိတ်အပိုင်းများ၏ အပိုင်းပိုင်းခွဲခြင်းနှင့် ခွဲထုတ်ခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်များကို သရုပ်ဖော်ထားသည်။
ကော်လံ၏ ထိရောက်မှုကို အကဲဖြတ်ရန် အညွှန်းတစ်ခု အဆိုပြုထားသည်။
> ကန့်သတ်ချက်များ
အစိတ်အပိုင်းများသည် အဆင့်နှစ်ဆင့်တွင် ဖြန့်ဖြူးမှုမျှခြေသို့ အမှန်တကယ်ရောက်ရှိနိုင်မည်မဟုတ်ပေ။
ကော်လံရှိ အစိတ်အပိုင်းများ၏ အလျားလိုက်ပျံ့နှံ့မှုကို လျစ်လျူရှု၍မရပါ။
အစုလိုက်အပြုံလိုက် လွှဲပြောင်းမှုဖြစ်စဉ်အပေါ် အမျိုးမျိုးသော အရွေ့ဆိုင်ရာအချက်များ၏ လွှမ်းမိုးမှုကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားခြင်းမပြုခဲ့ပါ။
မိုဘိုင်းအဆင့်၏ ကော်လံအကျိုးသက်ရောက်မှုနှင့် စီးဆင်းမှုအလျင်ကြား ဆက်နွယ်မှုကို ရှင်းပြ၍မရပါ။
ကော်လံအကျိုးသက်ရောက်မှုကို မည်ကဲ့သို့ အကျိုးသက်ရောက်စေမည့် အဓိကအကြောင်းအရင်းများ မရှင်းလင်းပါ။
ဤပြဿနာများကို နှုန်းသီအိုရီအရ ကျေနပ်စွာဖြေရှင်းနိုင်သည် ။
2. အဆင့်သတ်မှတ် သီအိုရီ
1956 ခုနှစ်တွင် ဒတ်ခ်ျပညာရှင် VanDeemter et al.ဗန်းသီအိုရီ၏ သဘောတရားကို စုပ်ယူကာ ဗန်း၏ အမြင့်ကို ထိခိုက်စေသော အရွေ့ဆိုင်ရာ အချက်များ ပေါင်းစပ်ကာ ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ် ဖြစ်စဉ်၏ အရွေ့သီအိုရီ - နှုန်းသီအိုရီကို တင်ပြကာ VanDeemter ညီမျှခြင်းမှ ဆင်းသက်လာသည်။၎င်းသည် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်ဖြစ်စဉ်အား ရွေ့လျားမျှခြေမဟုတ်သော လုပ်ငန်းစဉ်တစ်ခုအဖြစ် မှတ်ယူကာ အထွတ်အထိပ်ကျယ်ပြန့်ခြင်း (ဆိုလိုသည်မှာ ကော်လံအကျိုးသက်ရောက်မှု) ပေါ်ရှိ အရွေ့ဆိုင်ရာအချက်များ၏ သြဇာလွှမ်းမိုးမှုကို လေ့လာသည်။
နောက်ပိုင်းတွင် Giddings နှင့် Snyder et al ။VanDeemter ညီမျှခြင်း (နောက်ပိုင်းတွင် gas chromatography rate equation ဟုခေါ်သည်) နှင့် အရည်နှင့် ဓာတ်ငွေ့အကြား ပိုင်ဆိုင်မှု ကွာခြားချက်နှင့်အညီ liquid chromatography rate equation ( Giddings equation ) ကို အဆိုပြုခဲ့သည်။
(၁) Van Deemter ညီမျှခြင်း
Where: H: သည် ဘုတ်၏အမြင့်ဖြစ်သည်။
A- eddy diffusion ကိန်း၏ကိန်းဂဏန်း
B: မော်လီကျူးပျံ့နှံ့မှု၏ကိန်းဂဏန်းကိန်း
C: coefficient အစုလိုက်အပြုံလိုက်လွှဲပြောင်းခုခံမှုသက်တမ်း
(၂) Giddings ညီမျှခြင်း
အရေအတွက်နှင့် အရည်အသွေးပိုင်းခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း။
(၁) အရည်အသွေးပိုင်း သုံးသပ်ချက်
Qualitative chromatographic analysis သည် chromatographic peak တစ်ခုစီမှ ကိုယ်စားပြုဒြပ်ပေါင်းများကို ဆုံးဖြတ်ရန်ဖြစ်သည်။အမျိုးမျိုးသောဒြပ်စင်များသည် အချို့သော chromatographic အခြေအနေများအောက်တွင် တိကျသေချာသော ထိန်းသိမ်းမှုတန်ဖိုးများ ရှိနေသောကြောင့်၊ ထိန်းထားမှုတန်ဖိုးကို အရည်အသွေးအညွှန်းကိန်းအဖြစ် အသုံးပြုနိုင်သည်။အမျိုးမျိုးသော ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ် အရည်အသွေးဆိုင်ရာ နည်းလမ်းများသည် လက်ရှိတွင် ထိန်းသိမ်းထားနိုင်သည့် တန်ဖိုးများအပေါ် အခြေခံထားသည်။
သို့ရာတွင်၊ မတူညီသောဒြပ်ပစ္စည်းများသည် တူညီသော chromatographic အခြေအနေများအောက်တွင် တူညီသော သို့မဟုတ် တူညီသောထိန်းသိမ်းမှုတန်ဖိုးများ ရှိကောင်းရှိနိုင်သည်၊ ဆိုလိုသည်မှာ၊ သိုလှောင်မှုတန်ဖိုးများသည် သီးသန့်မဟုတ်ပါ။ထို့ကြောင့် ထိန်းထားမှုတန်ဖိုးများ တစ်ခုတည်းအပေါ် အခြေခံ၍ လုံးဝမသိသော နမူနာပုံစံကို သတ်မှတ်ရန် ခက်ခဲသည်။နမူနာ၏ အရင်းအမြစ်၊ သဘာဝနှင့် ရည်ရွယ်ချက်ကို နားလည်မှုအပေါ် အခြေခံ၍ နမူနာ၏ ပါဝင်မှုကို ပဏာမ စီရင်ဆုံးဖြတ်နိုင်ပြီး၊ ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်အထွတ်အထိပ်ကို ကိုယ်စားပြုသည့် ဒြပ်ပေါင်းကို ဆုံးဖြတ်ရန် အောက်ပါနည်းလမ်းများကို အသုံးပြုနိုင်သည်။
1. သန့်စင်သောပစ္စည်းများကို အသုံးပြု၍ အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု
အချို့သော chromatographic အခြေအနေများအောက်တွင်၊ အမည်မသိတစ်ဦးတွင် သတ်မှတ်ထားသော ထိန်းသိမ်းချိန်တစ်ခုသာရှိသည်။ထို့ကြောင့်၊ အမည်မသိပစ္စည်း၏ ထိန်းထားချိန်နှင့် တူညီသော ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်အခြေအနေများအောက်တွင် သိထားသော သန့်စင်သောဓာတ်၏ ထိန်းသိမ်းချိန်ကို နှိုင်းယှဉ်ခြင်းဖြင့် အမည်မသိကို အရည်အသွေးအရ ဖော်ထုတ်နိုင်သည်။နှစ်မျိုးလုံး တူညီပါက အမည်မသိ ပစ္စည်းသည် ထင်ရှားသော သန့်စင်သော အရာဖြစ်ပေသည်၊မဟုတ်ရင် မသိတာက သန့်စင်တဲ့ ပစ္စည်းမဟုတ်ဘူး။
သန့်စင်သောဓာတ်ထိန်းချုပ်မှုနည်းလမ်းသည် ပါဝင်မှုအတော်လေးရိုးရှင်းပြီး သန့်စင်သောဓာတ်ကို သိရှိထားသည့် အမည်မသိပစ္စည်းနှင့်သာ သက်ဆိုင်ပါသည်။
2. Relative retention value နည်းလမ်း
ဆက်စပ်ထိန်းသိမ်းမှုတန်ဖိုး α၊ အစိတ်အပိုင်း i နှင့် ရည်ညွှန်းပစ္စည်းများကြားတွင် ထိန်းညှိမှုတန်ဖိုးများ အချိုးအစားကို ရည်ညွှန်းသည်-
၎င်းသည် fixative နှင့် column temperature အပြောင်းအလဲဖြင့်သာ ပြောင်းလဲပြီး အခြားလည်ပတ်မှုအခြေအနေများနှင့် ဘာမှမဆိုင်ပါ။
အချို့သော stationary phase နှင့် column temperature တွင်၊ component i နှင့် reference material s ၏ ချိန်ညှိထားသော retention values များကို အသီးသီး တိုင်းတာပြီး အထက်ဖော်ပြပါ ပုံသေနည်းအတိုင်း တွက်ချက်ပါသည်။ရရှိထားသော နှိုင်းယှဥ်ထိန်းထားမှုတန်ဖိုးများကို စာပေရှိ သက်ဆိုင်ရာတန်ဖိုးများနှင့် အရည်အသွေးအရ နှိုင်းယှဉ်နိုင်သည်။
3, အထွတ်အထိပ်အမြင့်ကိုတိုးမြှင့်ဖို့လူသိများတဲ့တ္ထုများထည့်ခြင်းနည်းလမ်း
အမည်မသိနမူနာတွင် အစိတ်အပိုင်းများစွာရှိသောအခါ၊ ရရှိထားသော chromatographic peaks များသည် အထက်ဖော်ပြပါနည်းလမ်းဖြင့် အလွယ်တကူခွဲခြားသတ်မှတ်နိုင်လောက်အောင် သိပ်သည်းလွန်းသည် သို့မဟုတ် အမည်မသိနမူနာကို သတ်မှတ်ထားသည့်အရာခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအတွက်သာ အသုံးပြုသည့်အခါတွင်ဖြစ်သည်။
"ပထမဦးစွာ အမည်မသိနမူနာတစ်ခု၏ ခရိုမာတိုဂရမ်တစ်ခုကို ပြုလုပ်ပြီး၊ ထို့နောက် အမည်မသိပစ္စည်းတစ်ခုကို ပေါင်းထည့်ခြင်းဖြင့် နောက်ထပ် ခရိုမာတိုဂရမ်တစ်ခုကို ရရှိမည်ဖြစ်သည်။"အထွတ်အထိပ် မြင့်မားသော အစိတ်အပိုင်းများကို ထိုကဲ့သို့သော အရာများအတွက် သိနိုင်ပါသည်။
4. အညွှန်းကိန်း၏ အရည်အသွေးဆိုင်ရာနည်းလမ်းကို ထိန်းသိမ်းပါ။
ထိန်းထားမှုအညွှန်းကိန်းသည် fixatives များပေါ်တွင် ပစ္စည်းများ၏ထိန်းသိမ်းမှုအပြုအမူကိုကိုယ်စားပြုပြီး GC တွင် လက်ရှိအသုံးအများဆုံးနှင့် နိုင်ငံတကာအသိအမှတ်ပြု အရည်အသွေးညွှန်းကိန်းဖြစ်သည်။၎င်းတွင် ကောင်းမွန်သော မျိုးပွားနိုင်စွမ်း၊ တူညီသော စံနှုန်းနှင့် သေးငယ်သော အပူချိန်ကိန်းဂဏန်းများ၏ အားသာချက်များရှိသည်။
ထိန်းသိမ်းမှုအညွှန်းကိန်းသည် ငြိမ်ဝပ်နေသောအဆင့်နှင့် ကော်လံအပူချိန်တို့၏ ဂုဏ်သတ္တိများနှင့်သာ သက်ဆိုင်သော်လည်း အခြားစမ်းသပ်မှုအခြေအနေများနှင့် မဟုတ်ပါ။၎င်း၏ တိကျမှုနှင့် မျိုးပွားနိုင်စွမ်းသည် အထူးကောင်းမွန်ပါသည်။ကော်လံအပူချိန်သည် စာရေးကိရိယာအဆင့်နှင့် တူညီနေသမျှ ကာလပတ်လုံး စာပေတန်ဖိုးကို ဖော်ထုတ်ရန်အတွက် အသုံးချနိုင်ပြီး နှိုင်းယှဉ်ရန်အတွက် သန့်စင်သောပစ္စည်းကို အသုံးပြုရန် မလိုအပ်ပါ။
(၂) အရေအတွက် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း။
chromatographic quantification အတွက် အခြေခံ
အရေအတွက်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း၏တာဝန်မှာ ရောစပ်နမူနာရှိ အစိတ်အပိုင်း ရာပေါင်းများစွာကို ရှာဖွေရန်ဖြစ်သည်။
အပိုင်းအစများ။Chromatographic quantification သည် အောက်ပါတို့အပေါ် အခြေခံသည်- လည်ပတ်မှု အခြေအနေများ တသမတ်တည်း ဖြစ်နေသောအခါ၊ ဖြစ်ခဲ့သည်။
တိုင်းတာထားသော အစိတ်အပိုင်း၏ ထုထည် (သို့မဟုတ်) အာရုံစူးစိုက်မှုအား detector မှပေးသော တုံ့ပြန်မှုအချက်ပြမှုဖြင့် ဆုံးဖြတ်သည်။
အချိုးကျပါတယ်။ဆိုလိုသည်မှာ-
chromatographic quantification အတွက် အခြေခံ
အရေအတွက်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း၏တာဝန်မှာ ရောစပ်နမူနာရှိ အစိတ်အပိုင်း ရာပေါင်းများစွာကို ရှာဖွေရန်ဖြစ်သည်။
အပိုင်းအစများ။Chromatographic quantification သည် အောက်ပါတို့အပေါ် အခြေခံသည်- လည်ပတ်မှု အခြေအနေများ တသမတ်တည်း ဖြစ်နေသောအခါ၊ ဖြစ်ခဲ့သည်။
တိုင်းတာထားသော အစိတ်အပိုင်း၏ ထုထည် (သို့မဟုတ်) အာရုံစူးစိုက်မှုအား detector မှပေးသော တုံ့ပြန်မှုအချက်ပြမှုဖြင့် ဆုံးဖြတ်သည်။
အချိုးကျပါတယ်။ဆိုလိုသည်မှာ-
1. Peak area တိုင်းတာခြင်းနည်းလမ်း
Peak area သည် chromatograms မှ ပံ့ပိုးပေးသော အခြေခံ ကိန်းဂဏန်း အချက်အလက်ဖြစ်ပြီး တောင်ထွတ်ဧရိယာ တိုင်းတာခြင်း၏ တိကျမှုသည် အရေအတွက် ရလဒ်များကို တိုက်ရိုက် သက်ရောက်မှုရှိပါသည်။မတူညီသော အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်ရှိသော chromatographic peak များအတွက် မတူညီသော တိုင်းတာနည်းများကို အသုံးပြုခဲ့သည်။
ပမာဏခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုတွင် ဆောင်းရာသီ၏တန်ဖိုးအတိအကျကို ရှာဖွေရန်ခက်ခဲသည်-
တစ်ဖက်တွင် ပကတိဆေးထိုးသည့်ပမာဏကို တိကျစွာတိုင်းတာရန် ခက်ခဲခြင်းကြောင့် အခြားတစ်ဖက်တွင်၊
peak area သည် chromatographic အခြေအနေများပေါ်တွင် မူတည်ပြီး တန်ဖိုးကို တိုင်းတာသောအခါ chromatographic strip ကို ထိန်းသိမ်းထားသင့်သည်
အတူတူလုပ်ရတာလည်း မဖြစ်နိုင်သလို အဆင်ပြေမှာလည်း မဟုတ်ပါဘူး။မှန်ကန်စွာ ရနိုင်လျှင်ပင်
တိကျသောတန်ဖိုးကိုလည်း တစ်စုတစ်စည်းတည်း စံနှုန်းမရှိသောကြောင့် တိုက်ရိုက်အသုံးချ၍မရပါ။
2.Quantitative correction factor
အရေအတွက် တည့်မတ်မှုဆိုင်ရာ အဓိပ္ပါယ်ဖွင့်ဆိုချက်- detector သို့ ဝင်ရောက်သည့် အစိတ်အပိုင်း ပမာဏ (m)
၎င်း၏ chromatographic peak area (A) သို့မဟုတ် peak height () အချိုးသည် အချိုးညီသော ကိန်းသေတစ်ခု (၊
အချိုးကျ ကိန်းသေကို အစိတ်အပိုင်းအတွက် အကြွင်းမဲ့ ပြုပြင်မှု ကိန်းသေ ဟုခေါ်သည်။
ပမာဏခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုတွင် ဆောင်းရာသီ၏တန်ဖိုးအတိအကျကို ရှာဖွေရန်ခက်ခဲသည်-
တစ်ဖက်တွင် ပကတိဆေးထိုးသည့်ပမာဏကို တိကျစွာတိုင်းတာရန် ခက်ခဲခြင်းကြောင့် အခြားတစ်ဖက်တွင်၊
peak area သည် chromatographic အခြေအနေများပေါ်တွင် မူတည်ပြီး တန်ဖိုးကို တိုင်းတာသောအခါ chromatographic strip ကို ထိန်းသိမ်းထားသင့်သည်
အတူတူလုပ်ရတာလည်း မဖြစ်နိုင်သလို အဆင်ပြေမှာလည်း မဟုတ်ပါဘူး။မှန်ကန်စွာ ရနိုင်လျှင်ပင်
တိကျသောတန်ဖိုးကိုလည်း တစ်စုတစ်စည်းတည်း စံနှုန်းမရှိသောကြောင့် တိုက်ရိုက်အသုံးချ၍မရပါ။
ဆိုလိုသည်မှာ၊ အစိတ်အပိုင်းတစ်ခု၏ relative correction factor သည် အစိတ်အပိုင်းနှင့် ရည်ညွှန်းပစ္စည်းဖြစ်သည်။
ပကတိ တည့်မတ်မှု အချိုးအဆ။
နှိုင်းယှဥ်ပြင်ဆင်ချက်အချက်မှာ အစိတ်အပိုင်း၏အရည်အသွေး စံနှုန်းနှင့် ယှဉ်လိုက်သောအခါတွင် နှိုင်းယှဥ်ပြင်ဆင်ခြင်းအချက်မှာ ထင်ရှားပါသည်။
ဒြပ်စင် s သည် ညီမျှသောအခါ၊ ရည်ညွှန်းပစ္စည်း၏ အထွတ်အထိပ်ဧရိယာသည် အစိတ်အပိုင်း၏ အမြင့်ဆုံးဧရိယာဖြစ်သည်။
မျိုးစုံ။အကယ်၍ အချို့သော အစိတ်အပိုင်းများသည် ဒြပ်ထု m နှင့် peak area A ရှိလျှင် f'A အရေအတွက်
တန်ဖိုးများသည် ထုထည်ရှိသော ရည်ညွှန်းပစ္စည်း၏ အထွတ်အထိပ်ဧရိယာနှင့် ညီမျှသည်။တစ်နည်းပြောရရင်တော့,
နှိုင်းယှဥ်ပြင်ဆင်ခြင်းအချက်အားဖြင့်၊ အစိတ်အပိုင်းတစ်ခုစီ၏ အထွတ်အထိပ်နေရာများကို ခွဲခြားနိုင်သည်။
ရည်ညွှန်းပစ္စည်း၏ အထွတ်အထိပ်နေရာသို့ ၎င်း၏ဒြပ်ထုနှင့်ညီမျှသည်၊ ထို့နောက် အချိုးအစားသို့ ပြောင်းသည်။
စံနှုန်းသည် တစ်စုတစ်စည်းတည်းဖြစ်သည်။ဒါကြောင့် ဒါက အစိတ်အပိုင်းတစ်ခုစီရဲ့ ရာခိုင်နှုန်းကို တွက်ဆဖို့ ပုံမှန်နည်းလမ်းဖြစ်ပါတယ်။
ပမာဏ၏အခြေခံ။
နှိုင်းယှဥ်တည့်မတ်ခြင်းအချက်ကို ရယူနည်း- နှိုင်းယှဥ်ပြင်ဆင်ချက်အချက်တန်ဖိုးများကို ဖြစ်ခြင်းနှင့် နှိုင်းယှဉ်ခြင်းသာဖြစ်သည်။
တိုင်းတာမှုသည် စံနှုန်းနှင့် detector အမျိုးအစားနှင့် သက်ဆိုင်သော်လည်း လည်ပတ်မှုအပိုင်းနှင့် သက်ဆိုင်သည်။
အရေးမကြီးဘူး။ထို့ကြောင့် စာပေ၏ ကိုးကားချက်များမှ တန်ဖိုးများကို ပြန်လည်ရယူနိုင်သည်။စာသားရှိရင်
ပူဇော်မှုတွင် လိုချင်သောတန်ဖိုးကို ရှာမတွေ့ပါက၊ ၎င်းကို သင်ကိုယ်တိုင် ဆုံးဖြတ်နိုင်သည်။ဆုံးဖြတ်ချက်ချနည်း
နည်းလမ်း- တိုင်းတာထားသော အရာဝတ္ထု၏ ပမာဏအချို့ကို ရွေးချယ်ထားသော အကိုးအကားဆယ်ခု → အချို့သော အာရုံစူးစိုက်မှုအဖြစ် ပြုလုပ်သည်။
chromatographic peak area A နှင့် အစိတ်အပိုင်းနှစ်ခု၏ As တို့ကို တိုင်းတာခဲ့သည်။
အဲဒါ ဖော်မြူလာပဲ။
3. Quantitative တွက်နည်း
(၁) Area normalization နည်းလမ်း
အထွတ်အထိပ်မရှိသော အပိုင်းအစများ အားလုံး၏ အကြောင်းအရာ ပေါင်းလဒ်ကို ပမာဏအတွက် 100% အဖြစ် တွက်ချက်ခဲ့သည်
ထိုနည်းလမ်းကို normalization ဟုခေါ်သည်။၎င်း၏တွက်ချက်မှုဖော်မြူလာမှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်။
P နေရာတွင်၊ % သည် စမ်းသပ်ထားသော အစိတ်အပိုင်းများ၏ ရာခိုင်နှုန်းပါဝင်မှုဖြစ်သည်။A1၊ A2... A n သည် အစိတ်အပိုင်း 1.The peak area of 1~n;f'1၊ f'2... f'n သည် အစိတ်အပိုင်း 1 မှ n အတွက် နှိုင်းယှဥ်ပြင်ဆင်ချက်အချက်ဖြစ်သည်။
(၂) ပြင်ပစံနည်းလမ်း
နမူနာတွင် စမ်းသပ်မည့် အစိတ်အပိုင်း၏ တုံ့ပြန်မှု အချက်ပြမှု ပမာဏနှင့် ထိန်းချုပ်မှုအဖြစ် စမ်းသပ်ရမည့် သန့်စင်သော အစိတ်အပိုင်းတို့အကြား အရေအတွက် နှိုင်းယှဉ်မှု နည်းလမ်း။
(၃) ပြည်တွင်းစံနည်းလမ်း
Internal Standard Method ဟုခေါ်သော သန့်စင်သောဓာတ်ပမာဏအချို့ကို စမ်းသပ်ထားသော အရာဝတ္ထု၏ စံဖြေရှင်းချက်နှင့် နမူနာအဖြေကို အတွင်းပိုင်းစံအဖြစ် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာပြီး ဆုံးဖြတ်သည့်နည်းလမ်းတစ်ခုဖြစ်သည်။
(၃) စံထည့်နည်း
အတွင်းထပ်ပေါင်းနည်းဟုလည်း လူသိများသော စံထပ်ပေါင်းနည်းလမ်းမှာ (△C) ပမာဏအချို့ကို ပေါင်းထည့်ရန်ဖြစ်သည်။
စမ်းသပ်မည့်အရာ၏ရည်ညွှန်းချက်ကို စမ်းသပ်မည့်နမူနာဖြေရှင်းချက်တွင် ထည့်သွင်းခဲ့ပြီး စစ်ဆေးမှုအား စစ်ဆေးမှုတွင် ထည့်သွင်းခဲ့သည်။
ပစ္စည်းပြီးနောက်နမူနာဖြေရှင်းချက်၏အထွတ်အထိပ်သည် မူလနမူနာဖြေရှင်းချက်ထက် ပိုမိုမြင့်မားသည်။
နမူနာအဖြေတွင် ဓာတ်၏ပါဝင်မှုကို တွက်ချက်ရန် ဧရိယာတိုးခြင်း (△A) ကို အသုံးပြုခဲ့သည်။
အကြောင်းအရာ (Cx)
Ax သည် မူလနမူနာတွင် တိုင်းတာရမည့် အရာဝတ္ထု၏ အထွတ်အထိပ်နေရာဖြစ်သည်။
စာတိုက်အချိန်- မတ်လ ၂၇-၂၀၂၃